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液相色谱工作原理与基本构成

2025年12月11日

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一、液相色谱是什么?

液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,简称 HPLC,又称高效液相色谱)是一种以 液体为流动相 的现代分离分析技术,核心作用是将混合物中的不同组分高效分离,并对分离后的组分进行定性和定量分析。


二、液相色谱的基本构成

输液泵将流动相瓶中的溶剂经进样器送入色谱柱中,然后从检测器的出口流出。当样品从进样器注入时,流动相将其带入色谱柱中进行分离,分离后的各组分依次进入检测器,检测器输出的电信号供给数据处理及记录装置,得到色谱图。



三、输液泵

高压输液泵是高效液相色谱仪中关键的部件,其作用是将流动相在高压下连续不断地送入色谱系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。



四、进样器

进样器分为手动进样器和自动进样器,目前常用的是自动进样器,其具有自动化程度高、定量精准的优点。自动进样器有三种不同的进样方式,吸入式进样、推入式进样以及整体样品环式进样,这三种进样方式也各有优缺点。



五、柱温箱

待测物在色谱柱内的分离在于化学性或物理性的平衡状态,通过稳定地保持柱温,可使平衡稳定化,在试样的分离、选择性以及保留时间上得到良好的重现性。常见的温度调节方式有两种,分别是空气循环式,也是K2025使用的方式,空气循环式的柱温箱在箱体中的温度分布更加均匀,另一种是模块加热式,这种方式可能会让色谱柱产生局部过热等现象,影响色谱柱的分离效果。



六 检测器

检测器的作用是将柱流出物中的样品组成及含量变化转化为可供检测的信号。HPLC的检测器有五种,分别是紫外-可见光检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器。目前常用的检测器是紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器,因为大多数有机化合物在紫外可见光波段都有吸收。当化合物在紫外可见光波段没有吸收的情况下,会选择其他合适的检测器。



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