关黄柏性寒、味苦，可以清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮。关黄柏被收录于2020年版《中国药典》中，有阴虚火旺，盗汗骨蒸的功效。

功效：煎剂或乙醇浸液关黄柏，对各种病原菌均有不同程度的抑制作用，并且关黄柏具有显著而持久的降压作用，其提取物100毫克／千克皮下注射，对阿司匹林或结扎幽门引起的胃溃疡有显著抑制作用，对水浸法应激性溃疡也有效。

关黄柏也可以对抗激素的不良反应，如果长期服用大量激素导致出现烦躁、抑郁的情况时，可以使用关黄柏来进行缓解。

在关黄柏中盐酸小檗碱及盐酸巴马汀是主要的活性成分。其中盐酸小檗碱对痢疾杆菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、金葡菌、链球菌、伤寒杆菌及阿米巴原虫有抑制作用。盐酸巴马汀具有抗细菌感染、病毒感染、真菌感染的作用。

在2020年版《中国药典》规定，可利用高效液相色谱法测定制关黄柏中盐酸小檗碱及盐酸巴马汀的含量以控制药物质量。

1 仪器与试剂

2.1仪器

悟空wooking K2025高效液相色谱仪，超声波清洗仪，分析天平  

       

2.2试剂

乙腈，水，磷酸二氢钠，磷酸

2 实验方法

3.1对照品溶液的制备

分别称取盐酸小檗碱及盐酸巴马汀各5mg用60%乙醇溶液定容至100mL。

3.2 样品前处理

取本品粉末约0.2g，精密称定，置50mL量瓶中，加入60%乙醇40mL，超声处理（功率250W，频率40kHz）45分钟，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.3色谱参考条件

仪器: 高效液相色谱仪：K2025 P2二元高压输液泵、K2025 AS自动进样器、K2025 CO柱温箱、K2025 UVD紫外-可见光检测器；

流动相：A：乙腈；B：0.1%磷酸水溶液（加入磷酸二氢钠使其达到0.02mol/L的浓度）

柱温：35℃；

进样量:10μL；

流速：1mL/min；

波长：345nm；

梯度洗脱程序见表1：

表1 梯度洗脱程序

3 结果与讨论

4.1实验结果

按照上述色谱条件进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：

（1）对照品溶液重复性

 

图1 对照品溶液进样7针的重复性

表2 对照品溶液进样7针重复性数据统计

 

（2）供试品溶液重复性

 

图2 供试品溶液进样7针的重复性

表3供试品溶液进样7针重复性数据统计

 

4.2结论

保留时间以及峰面积的RSD（n=7）均小于0.3%，满足《中国药典2020年版》小于2.0%的要求，因此，使用wooking K2025的高效液相色谱仪测定关黄柏中盐酸小檗碱及盐酸巴马汀有良好的重复性。