中药材作为中华文明的瑰宝，内在成分十分复杂，这导致了其质量评价的难度相对较高。利用高效液相色谱法（HPLC），对中药材中的组分进行解析，测定各成分的含量，能够为中药材的质量评价提供有力的依据。

在使用HPLC进行中药材成分分析时，一个关键问题是不同成分的特征吸收波长存在差异。这意味着，如果在一个固定的波长下进行测定，可能无法同时准确地检测到所有成分。因此，为了满足不同化合物的检测需求，可以采用多波长切换的方法。

多波长切换法允许在分析过程中根据待测成分的出峰顺序，在不同时间段应用相应组分的特征吸收波长进行检测，这样就可以确保每种成分都能在其最佳的吸收波长下被检测，从而提高分析的准确性和可靠性。这种方法准确可靠，操作简单易行，可以使通常条件下的多次实验在一次操作中完成，实现一次进样同时对多种指标成分进行高灵敏的含量测定。

今天分享一篇由江苏省中国科学院植物研究所韦敏团队在药物分析杂志上发表的题为《基于多波长切换 HPLC 同时测定五加皮中 10 个成分研究》的文章，其中韦敏副研究员与钱怡云助理研究员同为该文通信作者。

细 柱 五 加 ( Acanthopanax gracilistylus W． W．Smith) 为五加科五加属植物，其根皮入药，称五加皮，具有祛风除湿、补益肝肾等作用，临床上主要用于治疗风湿痹病、筋骨痿软等。五加皮药材在国内外中医药市场上严重供不应求，同时存在质量良莠不齐的现象。2020 年版《中华人民共和国药典》五加皮项下只有定性鉴别项而无含量测定项。目前，针对五加皮药材的质量评价方法，多集中于单一成分类别，例如苯丙素类，黄酮类，萜类等，仍缺乏对五加皮中各类成分综合检测的方法。基于此，建立五加皮中多类成分的同时检测方法，对于提升五加皮药材质量标准，保障临床用药安全具有重要作用。

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实验过程

实验选用不同来源的细柱五加根皮样品，基于多波长切换HPLC技术，以乙腈-0.1% 磷酸水溶液为流动相，采用梯度洗脱的方式，建立了同时测定10个成分的检测方法，为提升五加皮药材的质量评价标准提供参考依据。

仪器：

悟空K2025高效液相色谱仪，配置K2025 P2 二元高压输液泵、K2025 UVD/DAD检测器、K2025 AS 自动进样器等。

方法：

色谱柱：Waters Atlantis^TM T₃色谱柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)

流动相：流动相A：乙腈，流动相B：0.1% 磷酸水溶液，梯度表如下：

流速：1.0 mL/min

柱温：35℃

波长时间程序表如下：

进样量：20 μL

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实验数据与结果

图1  混合对照品( A) 和样品( B) HPLC 图

表1  10 个成分回归方程和线性范围

表2  11 批样品中 10 个成分含量测定结果( n = 3)

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结论

不同来源的细柱五加根皮中，均含有较高含量的异贝壳杉烯酸( 5.26~21.18 mg·g ^-1）。各批次均检出松柏苷、咖啡酸以及异绿原酸A，其他成分含量差距较大。本实验建立的五加皮多指标质量评价方法，操作简单、准确，重复性好，为提高五加皮药材质量标准提供了依据。

悟空 K2025 高效液相色谱仪针对中药样本基质成分复杂多样的特点，秉承可靠、精准、友好、合规的设计理念，充分发挥仪器自身优势，提供中药材HPLC分析应用解决方案，为中药质量控制保驾护航。

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