化妆品是满足人们对美的需求的消费品，直接作用于人体，其质量关系人民群众健康。近年来，我国化妆品产业迅速发展，市场规模逐年增长，同时也出现了一些新情况、新问题。

非法添加等违法现象日益突出，2018年我国药监局针对不合格化妆品发布公告30条；2019年针对不合格化妆品发布公告更是达到了54条。其中，染发剂通告批次占到了不合格化妆品8成以上的比例。

染发剂直接接触皮肤，且在染发过程中需要加热，会使其中的苯类有机物通过头皮进入毛细血管，然后随血液循环到达骨髓，长期反复作用于造血干细胞会导致造血干细胞发生恶变，从而诱发白血病。

为了对化妆品生产经营活动及其监督管理予以规范，国家药品监督管理局制定修改了新的《化妆品监督管理条例》。

对苯二胺        2,5-二氨基甲       苯间苯二酚

对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚是染发剂中常见的物质，且这三种成分均具有一定的致毒致癌性。因此，新的《化妆品监督管理条例》对其添加限量进行了严格的规定。

当然，追求美丽是每个人都无法抗拒的事情，但要注意染发次数不宜太多，平时注重头发养护。

实验部分

高效液相色谱法检测染发剂中的对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚

仪器与试剂

仪器与设备：

悟空K2025高效液相色谱仪；分析天平；涡旋振荡器；离心机；超声波清洗机；容量瓶（10mL、25mL）等。

K2025高效液相色谱仪

试剂与材料：

符合GB/T6682的一级水；甲醇（色谱级）；乙腈(色谱级)；醋酸铵(色谱级)；氨水(色谱级)；对苯二胺，99.9%；2,5-二氨基甲苯，≥98.0%；间苯二酚，99.9%。

实验方法

样品前处理：

称取染发剂样品 0.1~0.5 g，置于25mL棕色容量瓶中，加入5％（w / v）亚硫酸钠1mL，再用10mL甲醇溶解样品，最后用流动相定容至刻度，在4000r/min条件下离心3min，取上清液用0.22μm有机相滤膜过滤，上机测定。

标准溶液配制：

将对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚标准品各10mg用甲醇完全溶解，转移至10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，即得对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚浓度均为1000mg/L的标准储备溶液；用流动相配制对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚浓度依次为1mg/L、5mg/L、10mg/L、50mg/L和100mg/L的系列混合标准工作液。

色谱条件：

a）色谱柱: C₁₈ 4.6×150mm，5μm或者相当的色谱柱；

b）流动相：乙腈:甲醇:0.02mol/L 醋酸铵缓冲液（pH7.5）（2.5:2.5:95）；

c）柱温：25℃；

d）进样量：20μL；

e）流速：1.0mL/min；

f）波长：280nm；

结果与讨论：

1、按照上述色谱条件进行采集，对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚系列混合标准溶液色谱图如图1所示（n=7）。

图1 对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚混标连续进样7针叠加色谱图

2、对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚混合标准溶液连续进样7针重复性测试，保留时间RSD依次为0.070%、0.045%和0.061%，峰面积RSD依次为0.374%、0.588%和0.091%。

表1  对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚混标连续进样7针重复性数据统计

3、将市售染发剂样品按照上述方法进行前处理后提取液连续进样7针，色谱图如图2所示（n=7）。

图2 市售染发剂样品提取液连续进样7针色谱图

4、该市售染发剂样品连续进样7针重复性测试数据见表2；经计算该染发剂中对苯二胺含量为1.29%，间苯二酚含量为0.97%，而2,5-二氨基甲苯未检出。

表2  样品提取液进样7针重复性数据统计

为了验证方法的可靠性，在染发剂样品中添加对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚，计算回收率，实验得到对苯二胺的回收率为93.29%，2,5-二氨基甲苯的回收率为99.25%，间苯二酚的回收率为99.77%，表明该方法完全满足要求。

讨论

结果表明，使用Wooking K2025 高效液相色谱仪测定测定染发剂中的对苯二胺、2,5-二氨基甲苯和间苯二酚，完全满足2021年版《化妆品监督管理条例》相关法规标准，为提高化妆品质量控制和监管水平提供了参考。